题目内容：

下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．

请据图回答：

（1）制备“工程菌”的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是_____________。

（2）若A为未知的目的基因，获得A常用的方法是_____________。

（3）A、B形成C的过程中，需要的工具酶有_____________和_____________。为了利于C进入D,常用__________________处理D。

（4）制备所得的“工程菌”用LB____________培养基进行扩大培养，操作过程中要用________和______________来配制该培养基，还要加入一定量的________，以维持一定的渗透压；培养基使用前必须用___________进行灭菌处理。