题目内容：

金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计 划通过多聚酶链式反应（PCR）扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净 化处理。PCR 扩增过程示意图如图，请回答下列问题：

（1）从高表达 MT 蛋白的生物组织中提取 mRNA，通过_____获得_____用于 PCR 扩增。

（2）设计一对与 MT 基因两端序列互补配对的引物（引物 1 和引物 2），为方便构建重组质粒， 在引物中需要增加适当的 _____ 位点。设计引物时需要避免引物之间_____，而造成引物自连。

（3）PCR 扩增时，退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏_____的碱基配对。退 火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但_____的引物需要设定更高的退火温度。

（4）如果 PCR 反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有_____（填序号：①升高退 火温度②降低退火温度③重新设计引物）。

（5）图中步骤 1 代表_____，步骤 2 代表退火，步骤 3 代表延伸。