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研究发现,斑马鱼的HuC基因在早期胚胎神经细胞中选择性表达,为了研究该基因转录起始位点上游的部分序列对该基因表达的影响,科研人员做了如下实验。 (1)为确定HuC基因的转录起始位点,提取斑马鱼早期胚胎...
题目内容:
研究发现,斑马鱼的HuC基因在早期胚胎神经细胞中选择性表达,为了研究该基因转录起始位点上游的部分序列对该基因表达的影响,科研人员做了如下实验。
(1)为确定HuC基因的转录起始位点,提取斑马鱼早期胚胎神经细胞的总RNA,以与____________互补的一段单链DNA序列作为引物,加入____________酶,获得cDNA。对该cDNA的序列进行测定,与HuC基因的序列比对,确定转录起始位点,定为+1号碱基,其上游的碱基定为负值。
(2)为了探究转录起始位点上游不同长度片段在基因转录中的作用,科研人员从____________(选填“基因组”或“cDNA”)文库中获取该转录起始位点上游的片段,用____________酶处理此片段和含GFP(绿色荧光蛋白)基因的载体,获得重组DNA分子。
(3)用不同种类的限制酶重复步骤(2),获得不同长度的重组DNA分子,通过显微注射方法分别导入斑马鱼的____________细胞,通过荧光显微镜观察早期胚胎神经细胞、肌肉细胞中的荧光强度,结果如图所示。
①获得图中所示的重组DNA分子,需要用到的限制酶有____________种。
②据图分析,缺失HuC基因上游的____________片段就会造成HuC基因在所有细胞中表达被完全抑制。-1962bp至-432bp片段的存在会____________HuC基因在肌肉细胞中的表达,对神经细胞中的表达____________。
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