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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图: (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的_____________...
题目内容:
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:
(1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的________________________。
(2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其_____________________分离出ES细胞。还可以从胎儿的____________分离获得ES细胞。
(3)ES细胞在形态上表现为体积小、细胞核________、核仁_________,在功能上,属于________(填“单能干细胞”“多能干细胞”或“全能干细胞”)。
(4)ES细胞是研究体外细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上,在培养液中添加_________,就可以诱导ES细胞分化,为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段。
(5)步骤③中,需要构建_________________________。可以根据Rag2基因的核苷酸序列,合成引物,利用____________技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有____________的酶切位点。
(6)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质,用抗____________的抗体进行杂交实验。
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