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基因敲除是应用 DNA 重组原理发展起来的一门新兴技术。以小鼠为实验动物构建“基因敲除细胞”的过程如下: 第一步:从囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因...
题目内容:
基因敲除是应用 DNA 重组原理发展起来的一门新兴技术。以小鼠为实验动物构建“基因敲除细胞”的过程如下:
第一步:从囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。
第二步:构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入新霉素抗性基因等。由于同源臂与靶基因的 DNA 正好配对,所以能像“准星”一样, 将表达载体准确地带到靶基因的位置。
第三步:将表达载体导入胚胎干细胞,并与其内靶基因同源重组,完成胚胎干细胞的基因改造。
第四步:基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。基本原理如下图所示。
请根据上述资料,回答下列问题:
(1)第一步分离出的 ES 细胞具体是由囊胚的_________分离培养获得,上述资料中的靶基因与目的基因的本质区别是_____。
(2)在把目的基因导入胚胎干细胞前,应首先完成_____,该过程中所需要的工具酶是_____,接入新霉素抗性基因的作用是_________。
(3)通过该技术获得一只含目的基因的小鼠,通过有性生殖产生的后代________(“是” 或“否”)都含该目的基因,原因是_____。
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