王老师
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CHO细胞血清培养
传统上CHO细胞的培养都是在DMEM／F12基础培养基中添加5~10的小牛血清(用于重组蛋白)或胎牛血清(用于杂交瘤生产)单抗来完成的,血清除了供给细胞的营养成分外,还能促进细胞开始合成DNA,对细胞的增殖有很大的作用.实验证明,血清在细胞的体外培养中提供了细胞增殖所必需的生长因子.但哺乳动物的血清价格昂贵,成本高不适于今天的大规模工业化生产.而且哺乳动物血清作为补加物,存在许多问题,首先血清的来源存在问题,血清来源于特定的地区,因而如果该地区发生灾荒或牛群中流行疾病,都可导致血清失去供应源.血清批量之间的差异大,重复性差,由于血清来源于动物,动物个体或群体的差异及时间上的差异都能导致每个批号的血清不完全一样.
从重组蛋白生产的角度来看,出于Q和Qc的要求,每换一个批号的血清,都包含大量的验证工作,这就给生产带来很大的麻烦.另外血清来源于动物因此经常被污染,污染的血清往往导致细胞生长缓慢,蛋白产量下降,甚至导致细胞死亡.目前购自各大公司的血清虽能消灭细菌和所有支原体,但很难保证除去所有的病毒污染.血清的成分十分复杂,经研究表明,血清除含有促进生长的活性成分外,还含有一定的细胞毒性物质和抑制物质,对细胞有去分化作用,影响细胞功能的表达 血清复杂的成分也给基因工程表达产物的下游工作带来很大的困难,因此成分明确,价格经济的无血清培养基成为CHO细胞培养的一种必然需求.
