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CRISPR/Cas9系统是一种广泛存在于原核生物基因中,是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。 CRISPR/Cas9技术为一种基因治疗法,这种方法能够通过DNA剪切技...
题目内容:
CRISPR/Cas9系统是一种广泛存在于原核生物基因中,是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。 CRISPR/Cas9技术为一种基因治疗法,这种方法能够通过DNA剪切技术治疗多种疾病。该技术的实质是用特殊的引导序列(sgRNA)将Cas9酶“基因剪刀”精准定位到所需切割的基因上,然后进行编辑。科研人员设想利用新一代基因编辑技术可拯救失明小鼠。回答下列问题:
(1)Cas9酶“基因剪刀”,又称____________,动植物细胞中没有编码Cas9酶的基因,可通过构建____________,用____________技术将其导人受体细胞最终表达出Cas9酶。
(2)小鼠失明的原因是其T细胞受损,免疫系统功能低下,利用 CRISPR-Cas9技术进行基因编辑,选择性地敲除细胞基因中一种编码PD-1蛋白的基因,从而将T细胞潜在的对肿瘤细胞的攻击能力“激活”。在体外进行T细胞培养扩增后,再输回患者体内,用T细胞去攻击肿瘤细胞达到预期的治疗目的。为有效阻止新分化生成的T细胞受损,科研人员将sgRNA序列导入骨髓____________细胞中,以构建 sgRNA-Cas9酶复合体。Cas酶可以催化____________键断裂,以实现对DNA序列的定向切割。设计sgRNA序列需要弄清目的基因的核苷酸序列,原因是______________________________________。
(3)为检测T细胞的受体基因(目的基因)是否成功被编辑,采用______________技术检测是否含有目的基因,还需要对______________进行检测。
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