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酿酒酵母不能利用木糖制约了利用植物原料生产乙醇的经济效益。木酮糖激酶是木糖转化、利用的关键 酶,为提高酵母细胞中木酮糖激酶的表达量,科研人员将两种启动子与木酮糖激酶基因结合并导入酿酒酵母细胞,构建 能...
题目内容:
酿酒酵母不能利用木糖制约了利用植物原料生产乙醇的经济效益。木酮糖激酶是木糖转化、利用的关键 酶,为提高酵母细胞中木酮糖激酶的表达量,科研人员将两种启动子与木酮糖激酶基因结合并导入酿酒酵母细胞,构建 能同时利用葡萄糖和木糖的重组酿酒酵母。下图表示相关研究过程,表是几种限制性内切酶的识别序列及切割位 点。请回答:
(1)重组质粒中终止子的作用是 ____________________。表中切割 DNA 后形成相同黏性末端的限制性内切酶是__________________,黏性末端为___________ 。
(2)过程③使用的限制性内切酶是 _________________。过程⑤需先用 LiAc 处理酿酒酵母细胞,其目的是 _________________________________ ,使细胞处于能吸收环境中DNA的状态。
(3)结合图示分析,进行工程菌筛选时,在含四环素的培养基上长出的菌落不一定是导入重组质粒的酿酒酵母,这是因为 _____________________________________ 。
(4)研究人员对筛选得到的两种重组酵母(甲中导入启动子 A,乙中导入启动子 B)细胞中木酮糖激酶活力及发酵乙醇得率进行比较(发酵条件:1 L 15 g·L-1 的葡萄糖和 50 g·L-1 的木糖培养基中,120 h)结果如下表。
重组酿酒酵母 | 木酮糖激酶酶活力U. mg-2 | 葡萄糖消耗量g.L-1 | 木糖消耗量g. L-I | 乙醇得率g/g |
重组酿酒酵母甲 | 0. 24 | 14. 59 | 48.61 | 0.34 |
重组酿酒酵母乙 | 0. 56 | 14.98 | 49.39 | 0.39 |
从木酮糖激酶酶活力分析,可以得出的结论是启动子 A 的功能比启动子B____,但本实验中乙醇得率相差不大,其可能的原因是____。
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