题目内容：

pIJ702是一种常用质粒，其中tsr为硫链丝菌素（一种抗生素）抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落：而限制酶A、B、C、D在pIJ702上分别只有一处识别序列。以B和C切取的目的基因置换pIJ702上0．4kb（1kb=1000对碱基）的B/C片段，构成重组质粒，如图。

1.构成重组质粒时除了限制酶还需用到工具酶是_____________。上述基因工程中的受体细胞是_____________（硫链丝菌/链霉菌）细胞。

2.将上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表中。

限制酶	pIJ702	重组质粒
A	5．7	1．6Kb，5．1Kb
D	5．7	2．2Kb，4．5Kb

 

 

由此判断目的基因内部是否含有限制酶A、D切割位点，其情况是目的基因中            。

A.只有A酶切割位点 B.只有D酶切割位点

C.两者都有切割位点 D.两者都没有切割位点

不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如表所示。

固体培养基中硫链丝菌素浓度（ug/mL）	0	1	2	5	10
不含质粒的链霉菌生长状况	+++++	+++	+	-	-

 

 

“+”表示生长；“-”表示不生长

3.若要筛选接纳了pIJ702或重组质粒的链霉菌细胞，所需的硫链丝菌素最小浓度应为____________ug/mL（填写表3中给定浓度）；含有重组质粒的菌落呈____________（白/黑）色。

4.上述目的基因来源于原核生物，其蛋白质编码序列（即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列）经测定为1256对碱基，试判断对这段序列的测定是否存在错误？并说明依据。____________。