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人类酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)在转基因植物中的表达量普遍较低,某科研小组通过添加增强子(增强它所调节基因的转录频率)、polyA序列(提高mRNA的稳定性)等表达控制元件提高了aFGF基因在紫...
题目内容:
人类酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)在转基因植物中的表达量普遍较低,某科研小组通过添加增强子(增强它所调节基因的转录频率)、polyA序列(提高mRNA的稳定性)等表达控制元件提高了aFGF基因在紫花苜蓿细胞中的表达量。下图表示操作的基本过程,质粒外面标注了限制酶酶切位点,质粒里面标注了相关的结构和基因(其中Kanr代表卡那霉素抗性基因)。请回答问题。
(1)①②过程构建重组质粒都需要使用限制酶和___________,限制酶酶XhoⅠ的识别序列是-C↓TCGAG-,aFGF基因被限制酶XhoⅠ切割后形成的黏性末端是____________。
(2)图中质粒均未标出_________(填结构名称);X、Y、Z三个酶切位点中,_________的酶切位点与其他两点不同。
(3)③过程用________预先处理农杆菌,可提高质粒4的导入率;进行④过程前,需提取农杆菌DNA,通过PCR进行基因扩增,鉴定其是否含目的基因,其设计引物的依据是__________________。
(4)转化后的紫花苜蓿外植体需经过_________过程才能长成完整植株,若长大后的转基因紫花苜蓿的aFGF表达量明显提高,请分析原因: _______________________。
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