题目内容：

内皮抑素是从血管内皮细胞瘤中分离出的一种内源性血管生成抑制因子，能特异性地抑制内皮细胞增殖和迁移。某小组为获得内皮抑素，构建分泌型内皮抑素基因表达载体，并在C6细胞（大鼠源性胶质瘤细胞）中表达。具体操作如下：

（1）构建分泌型内皮抑素基因表达载体

①采用相关技术提取1日龄SD大鼠大脑半球组织中的总RNA，检测RNA质量和浓度。

②内皮抑素cDNA的获得：以上述提取的RNA为模板，通过________过程获得cDNA，并利用PCR技术体外扩增cDNA。PCR技术中除需目的基因作为模板外，还需要的条件有________和控制温度等。

③为避免目的基因和载体自身环化，酶切目的基因和载体时，可用________酶切割，以保证目的基因两侧和载体上具有________。

（2）目的基因在C6细胞中表达（将目的基因导入C6细胞中，并表达）

①培养C6细胞时，为防止杂菌污染，可在培养基中加入一定量的________。

②若要检测目的基因是否成功整合到受体细胞的DNA上，可采用________技术。

③导入C6细胞中的目的基因成功表达后，会使C6细胞在大鼠体内的________可能会受到抑制。