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研究发现,M限制酶在大肠杆菌PUC18质粒(含氨苄青霉素抗性基因)的IacZ基因上存在唯一的酶切位点,如果IacZ基因没有插入外源基因,便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和Ⅹ-gal时,...
题目内容:
研究发现,M限制酶在大肠杆菌PUC18质粒(含氨苄青霉素抗性基因)的IacZ基因上存在唯一的酶切位点,如果IacZ基因没有插入外源基因,便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和Ⅹ-gal时,β-半乳糖苷酶能将Ⅹ-gal水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落,反之,则形成白色菌落。回答下列问题:
(1)已获得的目的基因可利用___________技术进行扩增,与体內DNA复制相比较,该反应要在___________中才能进行,并且要严格控制___________条件。
(2)构建重组质粒的过程中,需要用到的酶有___________。大肠杆菌需事先用Ca2+进行处理,目的是______________________。
(3)在选择培养基上加入IPTG、X-gal和氨苄青霉素,其巾氨苄青霉素的作用是筛选出____________。与“氨苄青霉素”筛选相比,“蓝白斑”筛选的优点是___________。若要挑取已导入目的基因的大肠杆菌,应选取___________色菌落。
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