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在基因工程的操作过程中,有多种方法可检测目的基因是否导入受体菌。回答下列问题: (1)PCR检测法:根据一段已知目的基因的核苷酸序列设计______________,对受体菌DNA进行扩增,经过解链、...
题目内容:
在基因工程的操作过程中,有多种方法可检测目的基因是否导入受体菌。回答下列问题:
(1)PCR检测法:根据一段已知目的基因的核苷酸序列设计______________,对受体菌DNA进行扩增,经过解链、______________、延伸三个步骤的循环,检测PCR产物的长度是否与目的基因一致。
(2)荧光蛋白基因筛选法:某种荧光蛋白(GFP)在紫外线照射下会发出绿色荧光。用_____________酶将目的基因和GFP基因拼接成融合基因,并与____________重组后导入受体菌,经培养筛选能发出绿色荧光的菌落。
(3)环丝氨酸辅助筛选法:四环素能使细菌停止生长但不致死;环丝氨酸能使正常生长的细菌致死,而对停止生长的细菌不致死。某质粒如图所示(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因),Tetr中插入目的基因后失活。用此质粒构建表达载体,转化细菌后,结果有3种:未转化的细菌、含质粒的细菌、含重组质粒的细菌。
①用含有__________和____________的培养基对上述3种细菌进行筛选,只有含质粒的细菌被淘汰,理由是______________;
②在上述筛选的基础上,若要筛选出含重组质粒的细菌,还需使用含有的______________培养基。
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