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天然大肠杆菌质粒一般含有lacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因;人工合成的大肠杆菌puc118质粒中含有lacZ基因外,还含有含氨苄青霉素抗性基因。若lacZ基因完整,便可表达出α-半乳糖苷酶,α-半乳...
题目内容:
天然大肠杆菌质粒一般含有lacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因;人工合成的大肠杆菌puc118质粒中含有lacZ基因外,还含有含氨苄青霉素抗性基因。若lacZ基因完整,便可表达出α-半乳糖苷酶,α-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色,形成蓝色菌落圈;若lacZ基因中插入了外源基因,带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达α-半乳糖苷酶,将形成白色菌落。此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功。
(1)目的基因是_____________________________。
(2)过程③④需要________________________酶。
(3)图中的培养基中除含有大肠杆菌必需营养成分外,还应加入____________________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(4)检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒。培养一段时间后出现三种类型:菌落处有蓝色、菌落处有白色、菌落不能生长。成功导入重组质粒的菌落圈的表现是______________。
有些菌落在该培养基中不能生长,原因是_____________________________________。
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