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以下是有关DNA粗提取实验的阅读材料: A.核酸极不稳定,在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶(水解DNA的酶)的抑制剂柠檬酸钠,以除去Mg,防止DNA酶的激...
题目内容:
以下是有关DNA粗提取实验的阅读材料:
A.核酸极不稳定,在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶(水解DNA的酶)的抑制剂柠檬酸钠,以除去Mg,防止DNA酶的激活。
B.核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白(由核酸和蛋白质组成)的形式存在, DNA核蛋白在1mol·L-1 NaCl溶液中溶解度很大,但在0.14mol·L-1 NaCl溶液中的溶解度很低;而RNA核蛋白溶于0.14mol·L-1 NaCl溶液。
C.用苯酚处理,可使蛋白质变性,且留在苯酚层内;在DNA溶液中加入2.5倍体积,浓度为95%的酒精,可将DNA分离出来。此时DNA十分粘稠,可用玻棒搅成团取出。
D.DNA在强酸环境下,水解产生脱氧核糖等小分子物质,它与二苯胺酸性溶液反应,能生成蓝色化合物。
E.实验材料与器械:柠檬酸钠溶液、石英砂、0.015mol·L-1 NaCl溶液、1mol·L-1 NaCl溶液、蒸馏水、苯酚、95%酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。
F.实验步骤:研磨得匀浆→过滤得滤液→滤液稀释6倍→离心处理得沉淀物 →沉淀物再溶解→加苯酚静置后去上清液→提取出DNA→DNA鉴定
请阅读以上材料回答下列问题:
(1)研磨时,取10g花椰菜,加适量的石英砂和____________ 、____________;
(2)将滤液稀释6倍,其目的___________________________________________;
(3)离心后得的沉淀物主要是:_____________________________;
(4)取沉淀物,置于2mL 1mol·L-1 NaCl 溶液中,使DNA核蛋白再次溶解,再加2mL苯酚充分震荡后静止,待其分层后弃其上层的苯酚。该步骤的目的是除去__________;
(5)如何将剩余溶液中的DNA提取出来? _________________________________;
(6)如何证明提取物确实是DNA分子? ___________________________。
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