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科研人员以金定鸭、长乐灰鹅和象洞鸡的全血为实验材料,比较苯酚—氯仿抽提法(方法A)和盐析法(方法B)提取血液中DNA的效率。图中EDTA具有破坏细胞膜、抑制DNA酶的活性的作用,SDS具有破坏细胞膜和...
题目内容:
科研人员以金定鸭、长乐灰鹅和象洞鸡的全血为实验材料,比较苯酚—氯仿抽提法(方法A)和盐析法(方法B)提取血液中DNA的效率。图中EDTA具有破坏细胞膜、抑制DNA酶的活性的作用,SDS具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性和抑制DNA酶活性的作用。提取过程和结果如下:
提取过程:
实验结果:
测定项目 | 金定鸭 | 长乐灰鹅 | 象洞鸡 | |||
| 方法A | 方法B | 方法A | 方法B | 方法A | 方法B |
纯度/OD值 | 1.95 | 1.96 | 1.85 | 2.36 | 1.96 | 1.90 |
浓度/μg.mL-1 | 534.29 | 240.00 | 899.17 | 583.33 | 385.35 | 914.17 |
(注)纯DNA的OD值为1.8,OD值在1.75~1.85间,DNA纯度较好;OD值高于1.8,一般有RNA污染;OD值小于1.8,一般有蛋白质或其他物质污染。
请回答:
(1)本实验不选择哺乳动物血液为实验材料的原因是__________________________________。
(2)步骤①中,若只用蛋白酶K消化处理,对实验结果的影响是______________________。
(3)步骤③中,破碎细胞常用的操作方法是___________________。步骤⑤加入蒸馏水的目的是_______________________________________。
(4)苯酚和氯仿-异戊醇不溶或微溶于水,密度均大于水,步骤②⑦所依据的原理是____________________________________________。
(5)对于长乐灰鹅来说,较适宜的DNA提取方法是_____________。
(6)实验结果表明,不同方法提取的DNA中,影响DNA纯度的主要物质是___________。相同体积的不同鸟类的血液DNA提取量有明显差异,其原因可能是_____________________________。
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