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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽。内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应。ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实现ETA基因在细胞中高效表达,为后期ET...
题目内容:
内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽。内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应。ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实现ETA基因在细胞中高效表达,为后期ETA的体外研究奠定基础。其过程如图(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为—C↓CCGGG—,限制酶XhoⅠ的识别序列为—C↓TCGAG—)。请分析回答下列问题:
(1)完成过程①需要的酶是_____________。
(2)过程③中,两种限制酶在切割DNA时,将_____________键断开,写出限制酶XhoⅠ切割形成的一个黏性末端_____________________________。
(3)在满足条件的情况下,图过程中③与⑤用两种限制酶分别切割目的基因与质粒,获得不同的黏性末端构建表达载体的方法与用同一种限制酶切割构建表达载体相比,其优点是________________。
(4)过程⑥中,要用_____________预先处理大肠杆菌,使其转变为能够吸收周围环境中DNA分子的___________________________细胞。为了将该过程获得的含重组质粒的大肠杆菌筛选出来,应使用含______________的培养基。
(5)图示过程中将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是__________________。
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