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[生物——选修3:现代生物科技专题] 人抗凝血酶Ⅲ由人体肝细胞产生,具有抗凝血、防血栓的作用。研究人员通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产人抗凝血酶Ⅲ。请回答下列问题: (1)获取人抗凝血酶Ⅲ基因常用方...
题目内容:
[生物——选修3:现代生物科技专题] 人抗凝血酶Ⅲ由人体肝细胞产生,具有抗凝血、防血栓的作用。研究人员通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产人抗凝血酶Ⅲ。请回答下列问题:
(1)获取人抗凝血酶Ⅲ基因常用方法有两种,一种是从人的_______中获取该基因mRNA,逆转录成cDNA。另一种是PCR,根据人抗凝血酶Ⅲ基因上游及下游的碱基序列,设计2种特异性引物,从染色体DNA上获取并扩增人抗凝血酶Ⅲ基因。在PCR过程中,两个引物是_________的结合位点,也是子链延伸的起点,dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)在此过程中的作用是提供______________。
(2)重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β–酪蛋白基因启动子、人抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子组成,其中__________决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。
(3)山羊的ES细胞来自早期胚胎干细胞。在饲养层细胞上培养时,ES细胞具有__________________的特性。将重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体包埋在由磷脂双分子层构成的脂质体内并转染ES细胞时,该表达载体进入ES细胞的方式为__________。
(4)对山羊进行同期发情和超数排卵处理,得到代孕母羊和多个卵母细胞,当卵母细胞培养至_________时,可去核并移入上述ES细胞的细胞核,完成核移植。为选择雌性胚胎,可在囊胚时取滋养层细胞做________分析用以鉴定性别。对于羊奶中是否含有人抗凝血酶Ⅲ,可用抗原–抗体杂交方法检测。
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