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我国肝损伤病的发生率较高。据研究,不同浓度的胰岛素对减缓肝细胞损伤有保护作用,且胰岛素浓度越高保护作用越强。LPS是一种导致肝损伤的常见物质(用生理盐水配制)。现欲以大鼠为材料验证上述结论,回答下列问...
题目内容:
我国肝损伤病的发生率较高。据研究,不同浓度的胰岛素对减缓肝细胞损伤有保护作用,且胰岛素浓度越高保护作用越强。LPS是一种导致肝损伤的常见物质(用生理盐水配制)。现欲以大鼠为材料验证上述结论,回答下列问题:
(1)材料制备:
①肝细胞悬液的制备:取某健康幼年大鼠的肝脏,适宜条件下取出剪碎再用______________酶消化,经多次洗涤离心处理得到分散的肝细胞,加入适宜的细胞培养液置于卡氏瓶和CO2培养箱中进行______________培养,将培养得到的肝细胞悬液随机分为5组,编号为A—E,每组均需再____________________________,置于相同且适宜的培养瓶中培养备用。
②胰岛素溶液:用生理盐水配制低、中、高三种浓度的胰岛素溶液,分别加入到C、D、E组的肝细胞悬液中。
(2)实验方案及结果预期:
①A组作为空白对照组,则往B、C、D、E组还需加入等量的______________。
②若本实验的结果用细胞存活率作为检测指标,各组的存活细胞数先用_________测出OD值,然后计算各组的细胞存活率。细胞存活率=该组OD值/A组OD值×100%,不考虑细胞死亡对OD值的影响。
③用柱形图表示各组的实验结果_____。
(3)实验从细胞水平分析推测胰岛素对减缓肝细胞损伤的机理可能有______________(至少写出二点)。
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