题目内容：

硒是一种生命必需的微量元素。亚硒酸钠对细菌的生长有明显的毒害作用，土壤中的一些富硒细菌可将其还原为红色单质硒。下图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。回答下列问题。

（1）若②中出现_________的现象，则说明培养基中的亚硒酸钠被细菌还原。

（2）梯度稀释的目的是_________。 将细菌从④接种至⑤应采用_________法。

（3）固定化富硒菌一般采用_________法。采用凝胶色谱法分离纯化还原亚硒酸钠的酶时，先从层析柱中洗脱出来的是相对分子质量较___________的蛋白质。

（4）研究人员筛选出--种只有较强富硒能力的菌株，现欲通过观察菌落来判断菌株对亚硒酸钠的耐受值，请将下列实验补充完整:

①配制系列浓度梯度的亚硒酸钠________（填“液体”或“固体”）培养基；

②向培养基中分别接种___________的该菌株菌液，在适宜条件下培养一段时间；

③观察菌落生长情况，________的培养基对应的最高亚硒酸钠浓度即为该菌株的最高耐受值。