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磷转运体Q蛋白家族在植物吸收磷元素中发挥重要作用,编码该蛋白家族的基因种类繁多(如Q1、Q2和Q3等)。为通过转基因技术提高紫花苜蓿的耐低磷能力,需筛选出低磷条件下高表达Q蛋白基因(高表达基因对应mR...
题目内容:
磷转运体Q蛋白家族在植物吸收磷元素中发挥重要作用,编码该蛋白家族的基因种类繁多(如Q1、Q2和Q3等)。为通过转基因技术提高紫花苜蓿的耐低磷能力,需筛选出低磷条件下高表达Q蛋白基因(高表达基因对应mRNA的量在细胞中也高)。回答下列问题。
(1)RT-PCR是以mRNA作为模板扩增得到DNA的技术,与传统PCR相比,进行RT-PCR时需额外添加的酶是________,反应体系中已存在不同Q蛋白对应mRNA、dNTP和所需的酶,要得到不同的Q蛋白基因,还需在反应体系中加入________。利用RT-PCR技术能筛选出高表达基因,推测其判断指标是________。
(2)将目的基因转入紫花苜蓿叶片细胞的常用方法是________,该方法需先将目的基因整合到Ti质粒的________中,由此,目的基因可整合到紫花苜蓿叶片细胞的染色体上。紫花苜蓿叶片细胞可通过________技术培养得到完整植株,其依据的原理是________。
(3)科学家将绿色荧光蛋白基因连接到筛选所得的目的基因之后,构建得到基因表达载体(两基因共用启动子和终止子,表达产物既能实现Q蛋白功能也能发绿色荧光),导入受体细胞一段时间后,可观测到细胞膜上呈现绿色荧光,说明________。这与目的基因的表达产物在细胞吸收磷元素中所发挥的作用相吻合。
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