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土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中,培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图,图中I~III为限制酶的酶...
题目内容:
土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中,培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图,图中I~III为限制酶的酶切位点,bar为抗除草剂基因,Kanr为卡那霉素抗性基因。请回答:
限制酶 | EcoRI | BamHI | HindIII | SacI |
识别序列和切制位点 | G1AATTCG | G1ATCC | A1AGCTT | GAGCT1C |
(1)过程①需要________的催化。过程③需要用________处理根瘤农杆菌,使其成为感受态细胞。
(2)过程①所用引物如下,则过程②使用的限制酶是_________和________
5'一CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG一3'
5'一CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA一3'
(3)花椰菜病毒启动子含有________的核苷酸序列,本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因,其目的是________。
(4)科研人员采用特定的方法大量提取成功转化的4株植株叶片的基因组DNA(目的基因中不含AAGCTT),用HindIII完全消化,消化产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交,其杂交带结果如图所示(图中数字标号代表转化成功的植株)。下列有关分析正确的有___。
①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示
②杂交带位置不同说明HindIIII消化形成的DNA片段长度不同
③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同
④目的基因插入到受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的
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