题目内容：

某实验小组用小球藻进行实验，探究影响光合速率的因素。他们将一定量的小球藻浸入适宜且相同温度的培养液的试管中，以白炽灯作为光源。移动台灯可改变光源与试管的距离；CO2浓度分别设置为0.03%和0.05%，根据实验结果绘制成曲线1、曲线2（如图所示）。请分析回答下列问题：

（1）比较C、D两点的光合速率，可见限制D点光合速率的主要因素是________。EF段________不再成为光合速率的主要限制因素，若C处突然关闭台灯，叶绿体中C3含量将如何变化？____________。

（2）F点的含义是________________________________。若用缺镁培养液培养小球藻，其他条件不变，F点应向________移。

（3）卡尔文给小球藻悬浮液通入14CO2，光照一定时间（从1秒到数分钟）后杀死小球藻，同时提取产物并分析。实验发现，仅仅30秒的时间，二氧化碳已经转化为许多种类的化合物。欲确认CO2转化形成的第一个产物的名称，应________光照时间并同时进行检测，当检测的化合物只有一种时，这种化合物就是第一个产物。

（4）该小组又做了探究小球藻最适生长温度的预实验，实验结果见下表：

温度（℃）	10	20	30	40	50
光照下释放O2（mg/h）	9．67	14．67	19．67	21．67	19．33

 

请根据预实验结果，设计进一步的探究实验：

材料用具：小球藻、大试管、含CO2缓冲液的培养液、水浴锅（控制温度）、量筒等。

该实验应控制好的两个主要无关变量是：

①_____________________________；②______________________________________。

实验步骤：

第一步：将等量的含有足量CO2缓冲液的培养液装入试管，___________________浸入试管中，分别放入5个水浴锅中 。

第二步：分组控制温度，使其依次为_____________________________，并分别编号（温度梯度差为1℃）。

第三步：光照6 h后测定O2的释放量。