题目内容：

凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中并使之表达。下图是基因工程中获取目的基因和构建重组质粒过程，请回答有关问题：

①科学家己经测出该酶的氨基酸序列，因此可以通过__________方法来获取目的基因，获得目的基因后，常利用PCR技术在体外将其大量扩增；②分析上图可知，构建重组DNA分子（如图所示）最好选用__________限制酶，理由是____________________。

（2）工业化生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，将目的基因导入大肠杆菌或芽孢杆菌前所做的处理方法是___________________。现在生产凝乳酶多采用重组毛霉或重组的酵母菌，毛霉或酵母菌作为受体细胞的优势是____________________。

（3）研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍，科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是___________。该生物工程技术的实质是__________。

（4）转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用，但是，胚胎工程只是指对动物的__________所进行的多种显微操作和处理技术。

（5）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理_________（至少答二项）。