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科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstI、SmaI、HindIII、AIuI等四种限制性核酸内切酶切割位点,下图是转基因抗冻番茄培育过程的...
题目内容:
科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstI、SmaI、HindIII、AIuI等四种限制性核酸内切酶切割位点,下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampt为抗氨苄青霉素基因),其中①∽④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤,I、II表示相关结构或细胞。请据图作答:
(1)在构建重组DNA时,可用一种或多种限制性核酸内切酶进行切割,为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接,在此实验中应该选用限制性核酸内切酶______________分别对鱼抗冻蛋白基因和质粒进行切割,切割后产生的DNA片段分别为__________、_________种。
(2)基因工程中核心步骤是_________(填序号),该步骤的目的是_________________________。为了使目的基因正常表达,其首端必须有启动子,它是___________识别和结合的部位。若限制酶切出了平末端,要选择___________进行连接。(填“E·coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”)
(3)图中将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞的方法称为____________________。它是利用运载体Ti质粒中含有___________,可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体上。
(4)检测番茄植株细胞中鱼抗冻蛋白基因是否成功表达,从分子水平常采用的方法是________。
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