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某植物蛋白酶抑制剂Ⅱ基因是重要的抗虫基因,该基因转录的mRNA下游序列已知,但其上游序列未知。现利用PCR等技术扩增该基因,具体原理如下图所示,其中①〜③表示有关过程,Ⅰ〜Ⅲ表示有关物质。请回答下列问...
题目内容:
某植物蛋白酶抑制剂Ⅱ基因是重要的抗虫基因,该基因转录的mRNA下游序列已知,但其上游序列未知。现利用PCR等技术扩增该基因,具体原理如下图所示,其中①〜③表示有关过程,Ⅰ〜Ⅲ表示有关物质。请回答下列问题:
(1)过程①反应体系中,需要加入__________种引物,还需加入__________酶,生成杂合链物质Ⅰ。
(2)利用DNA末段转移酶催化过程②,使cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列(AAA(A)n),其目的是_________________,进而利于过程③扩增获得目的基因序列Ⅲ,过程③反应体系需要添加的新引物序列是____________________。
(3)与物质Ⅲ相比,物质Ⅰ化学组成不同的是____________________。与过程③相比,过程①中碱某配对方式的不同之处是__________。
(4)在物质Ⅲ的两端通常还需要增加__________序列,以便与相应的载体重组,再利用__________处理大肠杆菌等,以利于将重组质粒导入细胞,构建cDNA文库。
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