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pBR322是一个由普通质粒经过人工添加许多限制酶识别序列而构建的重要质粒,有万能质粒之称,图甲是pBR322结构示意图(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。图乙表示几种限制...
题目内容:
pBR322是一个由普通质粒经过人工添加许多限制酶识别序列而构建的重要质粒,有万能质粒之称,图甲是pBR322结构示意图(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。图乙表示几种限制酶识别序列及其切割位点。回答下列问题:
(1)质粒是基因工程中常用的工具,其作用是____________________。人工构建pBR322过程中需要的酶是__________________________________________________。
(2)为扩增目的基因可采用PCR技术,该技术利用了_________原理,该技术的前提是需要根据________合成引物。
(3)由图乙可知,经Sau3AⅠ酶切割得到的目的基因可以与被__________酶切割的pBR322连接成重组质粒,原因是____________________。将切割后的目的基因与pBR322质粒混合,加入相应酶反应后,用得到的混合物直接转化处于感受态的大肠杆菌,感受态是指____________________的生理状态。
(4)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加__________,平板上长出的菌落,需要进一步鉴定才能筛选出含有目的基因的大肠杆菌的单菌落,原因是____________________。
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