题目内容：

真核生物基因中通常有内含子（位于编码蛋白质序列内的非编码DNA片段)，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。有人利用RT-PCR技术（mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增)，获得了牛的G基因，导入到大肠杆菌中，成功表达出G蛋白（一种免疫蛋白）。请回答下列问题：

（1）RT-PCR过程需要的酶有_____________；在进行PCR扩增时需要设计_________种引物。

（2）RT-PCR的产物经过BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切后，与经过同样双酶切得到的PBV载体连接，该操作程序属于_________，也是基因工程的核心步骤。与单一酶切相比，双酶切具有的优点是________________（答出两点）。

（3）若要检测G基因是否翻译出G蛋白，可采用的分子水平的检测方法是_________________。

（4）有人从牛的基因组文库中获得了G基因，同样以大肠杆菌作为受体细胞却未得到G蛋白，其原因是________________。