王老师
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提取部分:
①剪:越细越好,尽量去除叶脉等部分.
②加药品:二氧化硅、碳酸钙和丙酮.前两种是粉末状药品,各加少许,后者是有机溶剂,研磨时加约5ml.二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速;碳酸钙的作用是调节液体的pH,防止叶绿素被破坏保护叶绿素不分解;丙酮用来溶解提取叶绿体中的色素.
③磨:研磨要领是不能一下一下的砸,而是要用力的压 .研磨要迅速、充分.这是因为一是因为丙酮容易挥发;二是为了使叶绿体完全破裂,从而能提取较多的色素;三是叶绿素极不稳定,能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏.
④过滤:将研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一块单层尼龙布)中进行过滤.将滤液收集到试管中,及时用棉塞将试管口塞严.研磨液迅速倒入以及用棉塞是因为研磨加的丙酮很容易挥发.单层尼龙布是为了过滤充分,因为叶片的研磨有残渣.
分离部分:
1.制备滤纸条:将预备在试验桌上的滤纸条一端剪去两个角使之呈梯形.呈梯形,根据小孔(边缘)扩散原理,物质分子沿边缘扩散速度要大于里边扩散的速度,因此要将滤纸条的一端剪去两角,主要是为了延长边缘长度,这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀,便于观察实验结果.
2.画滤液细线:细,匀,直,浓.最好之前用铅笔轻轻地画一道线,放置色素带重叠,用提取液反复划好几次,每次划完尽量吹干,不要弄破纸条.用铅笔可以划得整齐,这样让每一种色素都有共同的起点.铅笔而不用钢笔是不易扩散.画得越细越多次,就越浓,越好跑,分得开,越清楚
3.层析分离叶绿体中的色素:将纸条画有滤液细线的一端置于烧杯中的层析液中,注意千万不要将滤液细线浸没在层析液中,因为色素易溶解于层析液中,导致色素带不清晰.层析液是挥发性较强的有机溶剂,并且具有一定的毒性,所以在操作中要尽量用培养皿盖住烧杯口.
4.观察实验结果:最后滤纸条上将分离出四条色素带,颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色,四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b.
还有疑问吗?
上面有画滤液细线的作用:让每一种色素都有共同的起点.跑步也有线的啊.画得越细越多次,就越浓,越好跑,分得开,越清楚.一定要细并且要直,这样可以防止色素带之间的重叠.画线时一般要重复多次,使滤液细线上的色素多一些,分离后的色素带更加清晰.但一次画完后,必须待其干后再画第二次,以确保滤液细线较细.